黄帮主 发表于 2022-4-14 14:11:46

10×TBE缓冲液：
即水中加入545g的Tris，278g的硼酸，46.5g的EDTA，补水至5L。

黄帮主 发表于 2022-4-14 14:21:45

DNA电泳上样缓冲液，5×点样液：
50%甘油
50mM EDTA（PH=8.0）
0.125%（W/V）溴酚蓝
0.125（W/V）二甲苯青

黄帮主 发表于 2022-4-14 14:59:01

蛋白质在聚丙烯酰胺胶的有效分离范围：
凝胶浓度：15%分离范围：12-43kDa
凝胶浓度：10%分离范围：16-68kDa
凝胶浓度：7.5%分离范围：39-94kDa
凝胶浓度：5%分离范围：57-212kDa

黄帮主 发表于 2022-4-14 15:23:09

本帖最后由 黄帮主 于 2022-6-17 14:22 编辑

蛋白电泳配制缓冲液：
30%凝胶储备液：其中含29%（w/v)的丙烯酰胺，1%（w/v)的N,N-亚甲双丙烯酰胺
10% SDS
TEMED
10%过硫酸铵
1.5M Tris.CL（PH=8.8)
1.0M Tris.CL（PH=6.8)

黄帮主 发表于 2022-5-6 15:05:06

本帖最后由 黄帮主 于 2022-6-17 13:04 编辑

TB缓冲液：每升液体中含2.3 g KH2PO4,16.4 g K2HPO4.3H2O, 12 g 胰蛋白胨, 24 g酵母提取物, 4 ml 100 % 甘油。

黄帮主 发表于 2022-6-17 13:12:42

本帖最后由 黄帮主 于 2022-6-17 13:13 编辑

30%丙烯酰胺混合液：
丙烯酰胺29g，N,N'-亚甲双丙烯酰胺1g，去离子水搅拌溶解，定容至100ml；

黄帮主 发表于 2022-6-17 14:23:13

1×Tris-甘氨酸电泳缓冲液：
25mM Tris
250mM 甘氨酸（ph=8.3）
0.1% SDS准确称取Tris3.0g，甘氨酸14.4g，SDS1.0g，去离子水搅拌溶解，定容至1L；

黄帮主 发表于 2022-6-17 14:44:12

SDS-PAGE上样缓冲液5xLoading buffer：
250mM Tris.cl（pH=6.8）
10% SDS
0.5% 溴酚蓝
50% 甘油
5% β-巯基乙醇


配制10ml的5×loading缓冲液，取2.5ml 1M Tris.cl（pH=6.8）,1g的SDS，50mg溴酚蓝，5ml的甘油，定容至10ml。
分装，每只1ml，4℃保存，使用时每1ml加入50ul的β-巯基乙醇。


黄帮主 发表于 2022-6-17 15:51:23

SDS-PAGE电泳染色液配置：
0.1%考马斯亮蓝R-250，25%异丙醇，10%冰醋酸，
R250（1L）：在合适体积的烧杯中，准确称取R2501.0g，甲醇250ml，乙酸100ml，补去离子水至1L，用滤纸去除颗粒物质。

黄帮主 发表于 2022-6-17 15:54:48

SDS-PAGE电泳脱色液配置：
醋酸100ml，乙醇50ml，充分混匀，补去离子水至1L，室温放置；
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