鼠疫耶尔森氏菌LcrV突变体的初步研究

黄帮主的小跟班

鼠疫耶尔森氏菌LcrV突变体的初步研究
王猛 2012 军事科学院生物工程研究所 导师 陈薇 硕士论文

黄帮主的小跟班

低钙反应抗原（是鼠疫耶尔森氏菌重要的毒力因子，同时也是鼠疫耶尔森氏菌主要的保护性抗原，它构成了型分泌系统注射体的针尖，调控型分泌系统的分泌，直接产生抗炎症作用，因而在鼠疫菌的感染与免疫屮发挥重要作用，。v抗原由个326氨基酸组成的，分子量37k，其273位氨基酸为半胱氨酸，可以此产生分子间二硫键形成同源二聚体，然而此半胱氨酸残基在感染与免疫中的意义尚未见文献报道。

黄帮主的小跟班

研究发现重组F和V抗原都能有效地保护实验动物抵抗鼠疫菌攻击，而二者联用可产生比单独使用更好的效果

由于F1抗原缺失的鼠疫菌仍然具有毒力，所以v抗原的免疫效果对新型亚单位鼠疫疫苗至关重要。

黄帮主的小跟班

v抗原因CYS273的存在导致其出现二聚体形式，虽然根据研究，单聚体和二聚体都具有免疫保护性，二聚体的免疫原性甚至更强，但实际生产过程中增加了质量控制的难度。本研究制备了Vm蛋白，对与在理化性质、免疫原性等方面进行比较，研究其作为新型亚单位鼠疫疫苗候选抗原的可行性。

将273位的半胱氨酸密码子进行缺失突变，构建了突变体的基因，结果显示，突变体蛋白获得高效可溶表达，大小约37k，符合预期，
结果表明，Vm抗原和V抗原的免疫原性和抗原性没有明显差异；免疫后均产生相应的高效价抗原特异性抗体，协同或干扰较少发生，激发的细胞免疫水平相似，均处于较低水平。