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经典免疫学实验

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发表于 2019-10-24 12:00:04 | 显示全部楼层 |阅读模式
本帖最后由 黄帮主 于 2019-11-5 15:04 编辑

实验中用到的经典免疫学实验:
双向琼脂扩散法实验单克隆抗体亲和常数测定







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 楼主| 发表于 2019-10-27 23:25:28 | 显示全部楼层
本帖最后由 黄帮主 于 2019-11-5 15:05 编辑

单克隆抗体亲和常数测定
    抗体亲合力是指抗体与抗原或半抗原结合的强度,是评价抗体性质的最重要的指标之一,其高低主要是由抗原和抗体分子大小,以及抗体分子与抗原决定簇结合的立体构象决定。亲和力的高低通常以结合常数(Ka)或解离常数(Kd)表示,Ka的单位是L/mol,Kd的单位是mol/L,两者互为倒数。Ka值越大,表示抗体的亲和力越高;相反,Kd值越大,则表示抗体的亲和力越低。
    本实验采用改良ELISA测定,其原理是为使抗原抗体反应系统的平衡点不受ELISA固相抗原的影响,先选择合适的浓度,将两者进行结合反应,然后在一定条件下采用ELISA定量反应系统测游离抗体浓度,经计算获得抗体的亲和常数。

实验流程见附件
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 楼主| 发表于 2019-11-5 09:39:16 | 显示全部楼层
本帖最后由 黄帮主 于 2019-11-5 09:40 编辑

双向琼脂扩散法实验
医学微生物和免疫学中常用的一个血清学实验,是临床中病原诊断和抗体效价测定的主要方法之一。
沉淀反应中的抗原叫沉淀原与沉淀原发生反应的抗体称为沉淀素将可溶性抗原和抗体置于琼脂凝胶板的对应孔中,两者各自在凝胶中向四周自由扩散,当抗原与抗体相遇,在比例合适时形成肉眼可见的白色沉淀线。


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发表于 2023-2-23 14:28:13 | 显示全部楼层
不是每个人都如您这样善于写PRotocol。真的很点赞,做实验室做这样才是大拿的开始啊。
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