pET系列载体

黄帮主 · 发表于 2022-9-24 00:03:25

本帖最后由黄帮主于 2022-11-3 20:28 编辑

Novagen 是德国 Merck KgaA集团子公司EMD 公司的品牌之一。
pET系列载体来自该公司。

黄帮主 · 发表于 2022-9-24 00:16:34

本帖最后由黄帮主于 2022-11-3 20:36 编辑

T7启动子是当今原核表达系统的主流，功能强大，专一性高。
T7启动子完全专一受控于T7 RNA聚合酶。
T7 RNA聚合酶合成mRNA的速度比大肠杆菌RNA聚合酶快5倍。
当两者同时存在时，宿主本身基因的转录竞争不过T7 RNA表达系统。
几乎所有的细胞资源都用于表达目的蛋白。
诱导表达后仅几个小时目的蛋白通常能占到细胞总蛋白的50%以上。
由于大肠杆菌本身不含有T7 RNA聚合酶，需要在大肠杆菌中引入外源的T7 RNA聚合酶。
因此T7 RNA聚合酶的调控模式就决定了T7系统的调控模式。

黄帮主 · 发表于 2022-11-3 20:29:32

本帖最后由黄帮主于 2023-3-8 16:46 编辑

pET-22b(+) 载体N端携带pelB信号肽序列，能进行周质表达，C端有his标签。
f1复制原点，加辅助噬菌体可以产生包含单链DNA的病毒颗粒。
Amp抗性。

黄帮主 · 发表于 2023-2-8 21:03:39

pET-28a-c(+)载体带有一个N端的His/Thrombin/T7蛋白标签，同时含有一个可以选择的C端His标签。
pET28a载体 kana抗性

黄帮主 · 发表于 2023-3-8 16:47:00

pET-15b，amp抗性。

黄帮主 · 发表于 2023-3-8 22:44:38

本帖最后由黄帮主于 2023-5-23 09:23 编辑

pET-32a（+) amp抗性

黄帮主 · 发表于 2023-3-12 00:53:14

pET-25b质粒
amp抗性

黄帮主 · 发表于 2023-6-10 00:43:09

pET-27b KANA抗性

黄帮主 · 发表于 2023-12-28 23:01:19

超声缓冲液：
01006 buffer A：50 mM Tris-HCl (pH 8.0), 150 mM NaCl

黄帮主 · 发表于 2024-2-20 14:16:37

来自SFV的Capsid蛋白N端前34个aa具有促进蛋白质翻译功能。

MNYIPTQTFYGRRWRPRPAARPWPLQATPVAPVV

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