human anti-plague monoclonal antibodies protect mice from Yersinia pestis in ...

黄帮主的小跟班

材料和方法
细菌菌株和栽培：鼠疫耶尔森氏菌co92，pgm-
蛋白质：纯化F1，V和F1-V[34]蛋白质抗原是从布拉德鲍威尔（美国，德特里克堡，弗雷德里克，马里兰州）获得的
人源和鼠源单抗：抗F1鼠源mAb F1-04-A-G1（或mF1）由乔治·安德森（USAMRIID）[13]和抗V鼠源mAbs 10-1m， 74-1m，84-1m，141-1m，以及IgG1鼠源抗伯克霍尔德里亚马莱（Bm）抗体从西尔维亚特雷维诺（USAMRIID）和抗V鼠标mAb 7.3从吉姆希尔（波顿唐， 英国威尔特郡）[14]，用于竞争ELISA和作为被动保护实验阳性对照。

黄帮主的小跟班

抗F和抗V Fab的筛选：
每种抗原共进行了四轮然后进行单克隆 ELISA 以选择阳性克隆。筛选出一百个克隆，只有显示OD405>2.0的克隆被选作质粒制备和测序。

黄帮主的小跟班

实验方法： 可借鉴英文写法
elisa检测抗体结合活性
IgG 与细菌细胞结合的流细胞学和免疫荧光分析
被动免疫和攻毒实验
被动免疫 检测抗体半衰期

黄帮主的小跟班

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2954148/

黄帮主的小跟班

他人文献引用这篇文献时是这样概括的：
2010 年 Xiao等［6］报道从非免疫人源噬菌体文库中筛选到 1 个抗F1 Fab 和 2 个抗 LcrV 的 Fab，当其转换成全分子人源抗体后，F1mAb 能保护 6 只小鼠中 1 只存活，而2 株抗 LcrV mAb 单独使用不具有保护效果，3 株mAb 协同使用能保护 6 只小鼠中的 5 只存活。此方法的优点是筛选到的 mAb 序列全人源，体内的免疫原性低，不足之处是因为没有经过初次免疫和加强免疫，获得的 mAb 亲和力和特异性差，保护效果难获满意，与文献报道的结果相互佐证［4］。