常用缓冲液的配制

黄帮主

10×TBE缓冲液：
即水中加入545g的Tris，278g的硼酸，46.5g的EDTA，补水至5L。

黄帮主

DNA电泳上样缓冲液，5×点样液：
50%甘油
50mM EDTA（PH=8.0）
0.125%（W/V）溴酚蓝
0.125（W/V）二甲苯青

黄帮主

蛋白质在聚丙烯酰胺胶的有效分离范围：
凝胶浓度：15%  分离范围：12-43kDa
凝胶浓度：10%  分离范围：16-68kDa
凝胶浓度：7.5%  分离范围：39-94kDa
凝胶浓度：5%  分离范围：57-212kDa

黄帮主

蛋白电泳配制缓冲液：
30%凝胶储备液：其中含29%（w/v)的丙烯酰胺，1%（w/v)的N,N-亚甲双丙烯酰胺
10% SDS
TEMED
10%过硫酸铵
1.5M Tris.CL（PH=8.8)
1.0M Tris.CL（PH=6.8)

黄帮主

TB缓冲液：

每升液体中含2.3 g KH2PO4,16.4 g K2HPO4.3H2O, 12 g 胰蛋白胨, 24 g酵母提取物, 4 ml 100 % 甘油。

黄帮主

30%丙烯酰胺混合液：
丙烯酰胺29g，N,N'-亚甲双丙烯酰胺1g，去离子水搅拌溶解，定容至100ml；

黄帮主

1×Tris-甘氨酸电泳缓冲液：
25mM Tris
250mM 甘氨酸（ph=8.3）
0.1% SDS

准确称取Tris3.0g，甘氨酸14.4g，SDS1.0g，去离子水搅拌溶解，定容至1L；

黄帮主

SDS-PAGE上样缓冲液  5xLoading buffer：
250mM Tris.cl（pH=6.8）
10% SDS
0.5% 溴酚蓝
50% 甘油
5% β-巯基乙醇


配制10ml的5×loading缓冲液，取2.5ml 1M Tris.cl（pH=6.8）,1g的SDS，50mg溴酚蓝，5ml的甘油，定容至10ml。
分装，每只1ml，4℃保存，使用时每1ml加入50ul的β-巯基乙醇。

黄帮主

SDS-PAGE电泳染色液配置：
0.1%考马斯亮蓝R-250，25%异丙醇，10%冰醋酸，
R250（1L）：在合适体积的烧杯中，准确称取R2501.0g，甲醇250ml，乙酸100ml，补去离子水至1L，用滤纸去除颗粒物质。

黄帮主

SDS-PAGE电泳脱色液配置：
醋酸100ml，乙醇50ml，充分混匀，补去离子水至1L，室温放置；