常用缓冲液的配制

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4x蛋白电泳上样缓冲液Loading Buffer：

4%SDS，20%甘油，0.1M pH6.8 Tris-HcL，5%巯基乙醇，0.2%溴酚蓝

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① SDS-PAGE上样缓冲液：5×Loading buffer：250mMTris.cl（pH=6.8），10% SDS，0.5% 溴酚蓝，50% 甘油，5%β-巯基乙醇。
配制10ml的5×loading缓冲液，取2.5ml 1M Tris.cl（pH=6.8）,1g的SDS，50mg溴酚蓝，5ml的甘油，定容至10ml。分装，每只1ml，4℃保存，使用时每1ml加入50ul的β-巯基乙醇。

② 1×Tris-甘氨酸电泳缓冲液：
25mM Tris，250mM 甘氨酸（pH=8.3），0.1% SDS

准确称取Tris3.0g，甘氨酸14.4g，SDS1.0g，去离子水搅拌溶解，定容至1L。

③ 30%丙烯酰胺混合液：
丙烯酰胺29g，N,N'-亚甲双丙烯酰胺1g，去离子水搅拌溶解，定容至100ml，过滤除菌，避光4℃储存。

④ 10%过硫酸铵：1g过硫酸铵加水至10ml，新鲜配置最好。

⑤ 10%十二烷基硫酸钠（SDS）：将10g电泳级的SDS溶于80ml去离子水或者蒸馏水中，将体积调整至100ml，室温可永久储存。

⑥ 1.5M Tris（pH=8.8）:将18.1gTris碱溶于80ml蒸馏水中，用浓Hcl将pH调至8.8，定容至100ml，高压除菌，室温储存。

⑦ 1M Tris（pH=6.8）:将12.1Tris碱溶于80ml蒸馏水中，用浓Hcl将pH调至6.8，定容至100ml，高压除菌，室温储存。

⑧ SDS-PAGE电泳染色液配置：0.1%考马斯亮蓝R-250，25%异丙醇，10%冰醋酸，
R250（1L）：在合适体积的烧杯中，准确称取R250 1.0g，甲醇250ml，乙酸100ml，补去离子水至1L，用滤纸去除颗粒物质。

⑨ SDS-PAGE电泳脱色液配置：醋酸100ml，乙醇50ml，充分混匀，补去离子水至1L，室温放置；

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50×TAE缓冲液：
2M Tris
1M 乙酸  
100mM EDTA
即将242g的Tris，加入57.1ml（17.4M）的冰乙酸，100ml的0.5M的EDTA（pH=8.0)，补水至1L。

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10×PB缓冲液，1L液体含2g KCl、14.4g Na2HPO4和2.4g KH2PO4，PH=7.4。使用时，稀释10倍。
抗体蛋白纯化时使用的试剂。

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常用限制酶的储存液：(参考Takara）
10mM Tris-cl ph=7.5
100mM kcl
10mM 氯化镁
0.1mM EDTA
1mM DTT
0.01% BSA
50% 甘油

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超声缓冲液：

500mMTris（pH=8.5），300mM Nacl，20mM咪唑，1%Triton X-100，1mM DTT，1mM PMSF

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各种pH值的Tris缓冲液的配制：

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EcoRI 10x缓冲液：
0.5M Tris-HCl pH 7.5，1M 氯化钠，0.lM 氯化镁。
连接酶缓冲液 (10x):
0.5M Tris-HCl, pH 7.5，0.lM 氯化镁, 0.lM DTT. -20℃保存。