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楼主: 傲慢与偏见

非洲动物锥虫病的纳米抗体

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 楼主| 发表于 2021-11-27 15:45:16 | 显示全部楼层
纳米抗体的制备,生产和纯化
钓取纳米抗体基因,用PstI/Eco91I两种酶对PCR产物进行酶切,插入到表达载体pHEN6c, pMECS以及pBAD中。
pHEN6c载体带有HIS标签。
pMECS载体在C端带有HA标签,再紧跟一个HIS标签。
pBAD载体在Nb基因后面紧跟一个生物素受体标签AVI-tag。
pBAD质粒转化DH5α WK6细菌中,同时共转化带有大肠杆菌生物素连接酶BirA的质粒,保证表达载体被生物素连接酶生物素化。

构建双价Nb44纳米抗体时,在两个单体之间加入GGGGS4标签。
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 楼主| 发表于 2021-11-27 17:50:51 | 显示全部楼层
本帖最后由 傲慢与偏见 于 2021-11-27 21:12 编辑

The Nb44/Nb42 LFA 能用于检测牛体内刚果锥虫的感染:

实验样本来自冻存的感染过刚果锥虫KONT 2/133和间日锥虫STIB 719 牛血浆。



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 楼主| 发表于 2021-11-27 21:32:41 | 显示全部楼层
在发展中国家,许多传染病未能根除的一个主要原因是监测不够和缺乏诊断设备。
快速诊断方法,如针对非洲锥虫病等热带病遇到了技术、基础设施和社会经济性质的挑战。
一个理想的生物标志物应该是特异性的、丰富的、稳定的、有定量意义的、普遍存在于宿主体内的、可从样品液体中获得的、及时观察到的和特征良好的。寄生物分泌体中的蛋白质可能满足上述要求,可以用于制备纳米抗体。



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发表于 2021-11-28 18:59:22 | 显示全部楼层
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