噬菌体抗体库技术--人源性ScFv抗体库的构建

黄帮主

噬菌体抗体库技术受益于两项技术的发展，噬菌体展示技术（2018年获诺贝尔化学奖）和PCR技术（1993年获诺贝尔化学奖）。
利用PCR技术可将全套的人或者其他生物抗体重链和轻链V区基因克隆出来，并在噬菌体表面表达、分泌、经筛选后获得特异性抗体，这种技术被称为噬菌体抗体技术，也称为组合抗体库。

黄帮主

噬菌体抗体库根据来源可以分为两类，一类是免疫抗体库，另一类是非免疫抗体库；免疫抗体库的抗体基因来源于抗原免疫个体，有较高的特异性，理论上讲能筛选到针对某一抗原的特异性抗体，库容量不需要太大；非免疫抗体库可以分为天然抗体库，半合成抗体库，以及全合成抗体库。其中，天然非免疫抗体库和免疫抗体库的抗体基因来源于机体淋巴细胞，需要分离提取纯化淋巴细胞后，提取RNA，经过RT-PCR获得抗体基因，根据不同的实验设计构建Fab库，ScFv库，或者Diabody库等等。

STEP 1:  分离全血中淋巴细胞，提取RNA

操作流程如附件PROTOCOL
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STEP 2 :准备噬菌体
操作流程如附件PROTOCOL
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phoenix_eagle

这个也只写 1/6. 还有 10个步骤左右没有粘贴成附件。吧。太开心了。