细胞培养常用到的数据

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各种培养瓶、培养皿规格及加液量，细胞含量

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细胞计数方法

细胞计数是细胞培养研究中的一项基本技术，它是了解培养细胞生长状态的重要手段。计数结果以每毫升细胞数表示。经典的细胞计数方法采用血清计数板，其依据的原理是:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时，通过测定一定体积悬液中的细胞的数目，即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。如果将细胞用台盼兰染色后再计数，则可同时获得细胞活力数据。

此外，目前有多种自动化/半自动化的细胞计数仪，为细胞计数操作提供了方便。

具体操作见附件

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基于293系统的瞬时表达抗体分子的实验操作

FreestyleTM 293系统是Invitrogen公司提供的一套完整的重组蛋白瞬时表达系统，能够稳定、快速、高效地表达满足实验室水平需求量的重组蛋白。 Freestyle™ 293-F来源于人胚肾细胞系HEK293，能实现多种蛋白，包括抗体分子的快速高效表达。

具体操作见附件

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FectoPRO DNA transfection kit for Bioproduction

特别适用于悬浮细胞的转染，比如CHO，293细胞等。

实验操作流程详见附件
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96孔细胞培养板分平底和圆底（U型和V型）
① 大部分贴壁细胞培养都用平底培养板，便于镜下观测、有明确的底面积、细胞培养液面高度相对一致，还便于MTT检测。
② U型培养板亦多用于培养悬浮型细胞。另外在免疫学方面﹐当做两种不同淋巴细胞混合培养时﹐需要二者相互接触以刺激﹐因此﹐一般需要U型板﹐因细胞会由於重力的作用而聚集在一个很小的范围内。
③ V型板的用途更少﹐一般用于细胞杀伤实验时﹐为了使效靶细胞紧密接触﹐常使用V型板，有时用做免疫学血凝集的实验。

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293细胞的种类：
293细胞是人肾上皮细胞系，有多种衍生株，来源都是人胚胎肾细胞，比较容易转染，是一个很常用的表达研究外源基因的细胞株。
293T细胞：表达SV40大T抗原，含有SV40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。瞬时转染293T细胞是过表达蛋白并获得细胞内及细胞外（分泌的或膜）蛋白的便捷方式。
AD293细胞：来源于HEK293细胞，进一步提高了细胞贴壁和噬斑形成能力。

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A549细胞：人肺泡腺癌基底上皮细胞。 1972 年发现，由D.J.Giard 等人 从58 岁的白种男性的外植肿瘤的癌性肺组织中分离并培养。 在体外培养时，作为单层细胞生长，粘附在培养瓶上。

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Bewo细胞：来自人绒癌脑转移组织，可以产生雌激素、孕激素、雌酮、雌二醇、雌三醇、hCG、胎盘催乳素、角蛋白等。

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CHO细胞：中国仓鼠卵巢细胞, 1957年美国科罗 拉多大学Dr. Theodore T. Puck从一成年雌性仓鼠卵巢分离获得，是目前用来表达外援蛋白最多的一种细胞系，在生物工程上广泛使用。

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Daudi细胞：典型的B淋巴母细胞，广泛应用于白血病发生机理的研究。1967年，由E.KleinandG.Klein从一位16岁黑人男性Burkitt's淋巴瘤患者体内分离而得。