关于抗体的读文献笔记

青龙偃月刀

噬菌体抗体库将基因型和表型结合起来，将选择能力与扩增能力偶连起来，具有强大的筛选功能，能够在体外模拟体内的抗体生成过程，使抗体工程技术进入了一个新的时代。
抗体库的筛选方法可分为 ：
（1）液相抗原的筛选，可较好地保持抗原的天然构象 ；
（2）完整细胞的筛选，适用于难以纯化的或未知的抗原，但此法细胞膜成分复杂，难度较大 ；
（3）组织筛选，用于一些难以获得单个细胞的组织进行特异性抗体的筛选。

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IdeS 是一种独特的半胱氨酸蛋白酶，在铰链区下方的一个单一氨基酸位点酶切IgG，可对多种来源的IgG进行酶切（人源，鼠源，兔，猴，绵羊、嵌合IgG、Fc融合蛋白等），特点是：高特异性单一酶切位点，30分钟快速酶切，操作简单快捷。
IgG抗体经过FabRICATOR酶切后，添加还原剂，可将IgG还原成三部分Fd'， LC ，Fc/2。

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重组抗体的表达：
在表达载体上装入信号肽序列，可以使抗体片段分泌到细胞外或周质腔。
信号肽可利用已知的PelB以及碱性磷酸酶(PhoA)；外膜蛋白A(OmpA)；A-溶血素蛋白(HlyA)等。
在表达时抗体完成切断信号肽，蛋白质折叠，二硫键形成，重、轻链的正确装配等一系列过程，能形成有活性的抗体分子。
融合点被断裂后必需能产生正确的Ｎ端。分泌到周质腔的抗体能正确地折叠和二硫键的形成，另外由于周质腔的蛋白酶较少，减少了对抗体的降解。

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IgG1-IgG4的四个亚型中，IgG1和IgG4是被最多采用的两个亚型。目前，已经上市的抗体药物中，绝大多数采用的是IgG1
。K药、O药等采用的是IgG4

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抗体药物很少选择IgG3的原因在于
① IgG3铰链区较长，更容易促进蛋白水解。
② 人群中存在很多种的IgG3同种异型抗体。
③ IgG3不能采用protein A纯化，制备不方便。
④ 和其他几个亚型相比较，半衰期短。

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治疗性抗体可通过多种方式发挥它们的功能：包括靶标调控、中和可溶性靶标 (如细胞因子)、破坏配体-受体互作以及影响细胞信号转导、与免疫效应功能衔接等, 例如, 抗体依赖的细胞毒作用 (ADCC) 和补体依赖的细胞毒作用 (CDC)。

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表面重塑技术（Resurfacing）用于抗体人源化
在选定突变位点的时候只考虑将处于抗体结构表面的氨基酸人源化，而将位于抗体结构内部的氨基酸维持其鼠源抗体序列。
减少了人源化过程中所需要突变的氨基酸数量，从而有助于抗体保持其抗原亲和力及生理功能。
设计的原理是考虑ADA产生的过程中，需要B细胞通过BCR来识别抗体表面的B cell epitope，而其内部的鼠源序列因为没有暴露而不会被B细胞识别从而产生ADA反应。

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单克隆抗体在生物学和医学研究领域具有很大的应用价值，可直接用于人类疾病的诊断，机体免疫机制的研究以及实验室科学研究等，尤其可为人类恶性肿瘤的免疫诊断提供较为可靠的辅助指标。

近年来，免疫检测成为癌症诊断的研究热点。
血清P53抗体检测
癌胚抗原CEA检测
神经元特异性烯醇化酶(NSE）检测
细胞角蛋白（CYFRA21-1）片段检测