隐孢子虫病

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隐孢子虫病（Cryptosponidiosis）是一种人兽共患性寄生虫病，呈全球性流行，其感染途径主要是入侵肠道上皮细胞。
牛已成为人患隐孢子虫病的主要来源，牛可感染的隐孢子虫类型中以微小隐孢子虫感染最为普遍，可引起犊牛的严重腹泻，每年对养牛业造成巨大经济损失，
且尚无隐孢子虫病特效药物或疫苗。

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隐孢子虫在联合国粮食农业组织（FAO）和世界卫生组织（WHO）列举的 24 种重要的食源性寄生虫中排第5，是近年来被忽略的重要人兽共患性寄生虫。

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隐孢子虫卵囊广泛分布于环境中，易感染人群包括农场工人、兽医和宠物主人等。隐孢子虫的间接传播主要是通过食用生的水果蔬菜、未经高温的牛奶，未熟的生肉，饮用或接触被污染的水等等。
大多数隐孢子虫病患者常以腹泻为主要临床症状，免疫力底下的病人病程一般持续两周左右，其症状主要为发热、呕吐、恶心等，隐孢子虫病呈世界范围性流行，尤其是在贫困地区，隐孢子虫是引起新生儿童腹泻、营养不良的重要因素。
仅在5 岁以下儿童的统计数据中，全世界每年大约有 800 万名儿童死亡，其中因腹泻致死的占10.5%，而据调查显示在亚洲和非洲，隐孢子虫是引起儿童腹泻的第二大诱因，仅排在轮状病毒之后。

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微小隐孢子虫病毒（CSpV1）是一种 dsRNA 病毒，存在于隐孢子虫的卵囊中。CSpV1 分别由 L-dsRNA 和S-dsRNA 两种核酸组成。
其表面单层衣壳层，位于隐孢子虫卵囊的顶端，为 S-dsRNA 基因所编码，基因大小为1.347kb，蛋白大小为 37KDa，可作为人隐孢子虫和微小隐孢子虫的检测标志。L-dsRNA 编码 RNA 依赖的 RNA 聚合酶，大小为 1786bp。

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目前的研究中发现在人隐孢子虫（C.homini）、猫隐孢子虫（C.felis）、火鸡隐孢子虫（C.moleagridis）和微小隐孢子虫（C.parvum）的卵囊中均存在病毒，微小隐孢子虫病毒在卵囊中数量多，易于检测，且存在稳定，所以可作为牛感染微小隐孢子虫的重要指标。微小隐孢子虫病毒衣壳蛋白定位于卵囊的顶端，微小隐孢子虫病毒可以作为一种微小隐孢子虫检测的标志。

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衣壳蛋白基因序列：
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粪便样品处理方法：

① 将粪便与水混匀后，经 60 目筛过滤，将过滤样品经 3000r/min，离心25min
② 将上步沉淀经等体积饱和硫酸锌溶液重悬，经 3000r/min，离心 10min
③ 将上清冰浴超声，超声 5min，后经 5000r/min 离心 3min，保留上清进行后续实验