关于纳米抗体的读文献笔记

青龙偃月刀

具有抗原特异性的纳米抗体具有广泛的应用前景。到目前为止，筛选得到的纳米抗体主要来源于免疫库。
纳米抗体最直接的应用是用于蛋白质纯化和识别。
如抗gfp或者抗yfp纳米抗体固定在琼脂糖树脂上，可用于纯化来自哺乳动物细胞裂解液中和GFP或者YFP融合的低表达蛋白。
抗原特异性纳米抗体和碱性磷酸酶或辣根过氧化物酶偶联后，可以用于酶联免疫吸附试验，已成功应用于病毒检测和毒性物质检测。
用合成库筛选得到的抗PA的纳米抗体，可以固定在96孔板上，建立了PA-ELISA检测系统捕捉PA。
该系统可检测50-1000 ng / mL的PA抗原。

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纳米抗体可以用于结构分析：
对于处于高度动态的蛋白质，如淀粉样蛋白和一些膜蛋白的结构比较复杂，这些结构在未能达到动态平衡时很难判定。
Nb和抗原结合时能减少抗原的流动性，将其固定在一个优化的状态。构象特异性纳米抗体不仅提高了我们对G蛋白偶联受体GPCR生物学的认识，而且进一步加深了我们对整体膜蛋白受体生物学的认识。有助于理解靶蛋白在激活状态下的分子状态，及允许使用纳米抗体锁住药物构象中的受体，促进新药物的发现。
2018年以前，所有靶向GPCR的纳米抗体均来自免疫文库。由于合成纳米体库的广泛适用性，目前已经建立了几个库用于构象特异性纳米抗体的筛选。
到目前为止，有超过150种纳米抗体--抗原的共结晶结构上传至wwPDB数据库。
随着越来越多的研究使用合成纳米体库，相信在不久的将来，将探秘出更多的共结晶结构。

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纳米体除了在体外使用外，细胞内表达纳米抗体可以有很多应用。
第一个好用的工具是将纳米抗体与荧光蛋白融合，从而生成自带细胞内荧光、识别抗原的纳米抗体。这种荧光抗体可以在活细胞中表达，用于识别和追踪抗原。它们已经成功地用于定位细胞间隔，如细胞骨架肌动蛋白丝和组蛋白染色质标记。
胞内纳米抗体还可用于超分辨率成像。超分辨率显微镜总是需要光稳定性标记，而在广泛的图像采集过程中，荧光纳米抗体遭受光后荧光容易淬灭。将纳米抗体与有机染料结合，可发展成为超分辨显微镜中极具吸引力的探针。

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胞内纳米抗体可以用作蛋白质敲除工具。
如开发了deGradFP方法，可以通用于监测活细胞中蛋白质敲除。
将抗GFP的纳米抗体基因与一个果蝇的F-box结构域进行融合。
在真核细胞中，纳米抗体与和GFP融合的抗原结合，抗原多泛素化后，通过泛素耗尽通路以降解和GFP融合靶点蛋白，该技术被用于降解转录因子和参与转基因果蝇形态发育的相关蛋白。