关于抗体的读文献笔记

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HuCAL建库基础：根据现有数据统计和归纳，参考胚系基因的利用率，氨基酸序列多样性，空间构象等。
将现有人源抗体的可变区按照重链和轻链分组，分别代表人抗体序列的七个胚系基因。其中重链分为VH1A，VH1B，VH2，VH3，VH4，VH5和VH6
轻链则按Kappa链和Lambda链进行分类，分别再分为四个组和三个组。

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抗体的生物学特性：

① 特异性结合抗原

② 激活补体

③ 结合Fc受体

④ 穿过胎盘

⑤ 免疫调节

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单抗的应用：

① 沉淀反应：

② 凝集实验：haemaglutination

③ 放射免疫学方法检测免疫复合物

④ 流式细胞仪：用于细胞的分型和细胞分离。

⑤ ELISA  等免疫学检测

⑥ SPR检测或与蛋白的亲和力  。

⑦ 免疫印记。

⑧ 免疫沉淀：

⑨ 亲和层析：分离蛋白质

⑩ 磁珠分离细胞

11. 临床疾病的诊断和治疗；

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传统抗体的噬菌体文库构建时，很难解决轻重链的错配问题。纳米抗体文库的构建，单B细胞克隆技术则避免了轻重链错配的问题。

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抗体分子超家族：
细胞膜表面和机体某些蛋白子分子，其多肽链折叠方式与Ig折叠相似，在DNA水平和氨基酸序列上与Ig的V区或C区有较高的同源性，被认为可能从同一祖先基因经过复制和突变衍生而来，编码这些多肽链的基因被称为免疫球蛋白基因超家族。

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根据抗体H链的不同，可以分为IgM，IgA，IgG，IgD，IgE，共五种类型。

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1. IgG
占血清免疫球蛋白的75-80%，以单体形式存在。
IgG主要由脾脏和淋巴结中的浆细胞，半衰期约为23天，是所有Ig中半衰期中最长的，更易透过毛细血管壁弥散到组织液中。
包括脑脊液在内的所有组织和体液中都存在IgG，具有较强的抗感染，中和毒素和免疫调理作用。
是唯一能通过胎盘的抗体，胎盘里的IgG含量比血清中浓度要高很多，对新生儿抵抗感染起重要作用。根据免疫球蛋白G分子中γ链抗原性差异：
人免疫球蛋白G有4个亚类，IgG1，IgG2，IgG3，IgG4
小鼠4个亚类，IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG3

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1.1 IgG1生理特性：
IgG1是血浆中含量最多的一种亚型。它是肿瘤免疫治疗中最具潜力的亚型，而且由于人IgG1也能够有效结合鼠源Fcγ受体，因而在小鼠体内模型中也能够观察到明显的效果。同时由于这种有效结合，其在体内的血清半衰期时间较久。
从工业化角度看，IgG1能够在杂交瘤细胞（CHO）中高表达并可用高效经济的方式进行纯化（Protein-A），同时具有较高的稳定性。这些特征都决定了IgG1是一种比较理想的可工业化生产（GMP）的抗体。IgG1是现阶段最常被使用的Fc亚型，科学家在此基础上通过Fc工程化策略来优化其功能特性，稳定性和药代动力等特征。

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1.2 IgG2生理特性：

IgG2主要用来中和抗原或阻断受体配体的结合，其CDC和ADCC效应表现非常弱，在早期基于其上市的仅为EGFR抗体。
但随着免疫检查点研究的兴起，越来越多的基于IgG2的药物进入临床并上市， IgG2虽然和C1q的结合比较弱，但当抗原或抗体溶度较高时仍旧可以引发CDC效应，同时IgG2是唯一可以结合FcγRIIa (CD32a)的亚型，而且这种结合可以通过单核苷酸多态性（SNP）进行调节，这种多形性可影响IgG2的功能活性。因而FcγRIIa高亲和力变异体(131-His)经髓系细胞介导后可诱导Anti-CD3-IgG2介导的T细胞活化和增殖。

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1.3.IgG3生理特性：
IgG3有一个延长的铰链区域，其核心铰链区有11对二硫键，因此对于蛋白酶切割不稳定。IgG3与FcγRs的结合能力最强，能引发ADCC和ADCP，且CDC效应比IgG1更强。但IgG3的半衰期更短，其R435不同于其他IgG分子的H435，这影响了其与FcRn的结合，考虑到药代动力学需要更频繁的给药，因而很少选择用来开发抗体药物。同时从经济角度来看，IgG3抗体无法用现阶段工业化常用的Protein-A来进行纯化，且易形成多聚体，这无疑会大大增加纯化成本，这进一步抑制了基于此亚型的抗体开发。