blinatumomab博纳吐单抗

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德国抗癌药物研发公司Micromet研发了三个双特异性抗体，分别是MT103、blinatumomab (INN)与 AMG 103。Blinatumomab是一种含有两个串联scFv的无糖基化的鼠源性抗体。
2011年Micromet公司发布了Blinatumomab的一项小规模II期临床试验结果，结果显示化疗后存在微小残留灶的急性淋巴性白血病患者，使用Blinatumomab后完全缓解率达到80%。2012年1月头安进公司收购了Micromet公司，从而获得了Blinatumomab的开发权。
2012年安进公司公布了Blinatumomab的一项大规模II期临床试验结果，复发或难治型急性淋巴性白血病患者使用Blinatumomab后完全缓解率达到43%。

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Blinatumomab是BiTE（双特异性T细胞衔接器，bispecific T-cell engager）抗体药物，同时针对肿瘤细胞表面的CD19抗原和T细胞表面的CD13抗原。
CD19是一种特异性的B细胞质膜蛋白，参与PI3/AKT通路的调节，在B细胞的增殖与分化中起到很至关重要的作用。CD19在浆细胞中表达很少，却在B细胞的增殖过程中持续表达，CD19是抗体靶向B细胞的靶点。结合B细胞抗原CD19的scFv片段KD值为1nM，而结合CD3的scFv片段KD值为100nM。
抗CD19与抗CD3的scFv分别用(Gly4Ser)3连接可变区将两个scFv进行串联。
在单个BiTE中，可变重链(VH)与轻链(V L)的特定顺序对blinatumomab的活性是至关重要的，在多种V H/V L组合中，只有一种成为了药物。

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2018.03，美国FDA宣布加速批准Blincyto（blinatumomab）的扩大适应症申请，允许该药治疗罹患B细胞前体急性淋巴性白血病（ALL），且在缓解期依旧有微小残留病灶（MRD）的儿童和成人患者。值得一提的是，这也是美国FDA批准的首款治疗MRD阳性ALL的疗法。
B细胞前体ALL是一种病发于骨髓，且进展快速的癌症。患者的骨髓里会产生过多的不成熟白细胞，影响骨髓的功能。在这些患者经过治疗后，依旧会有不少人体内会带有微小残留病灶。尽管这些病灶在显微镜镜检下也无法被发现，但却给患者留下了疾病复发的隐患。

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在一项单臂临床研究里，Blincyto在MRD阳性ALL的患者中展现出了很好的疗效。这些患者曾有1到2次完全缓解，但骨髓里依然存有癌细胞，比例约占细胞总数的千分之一。在经过治疗后，即便是能从10000个细胞里挑出1个细胞的高精度检测，也无法在患者体内检测出MRD，证实了Blincyto的效果。
总体来看，有70%的患者再也检测不出MRD，超过一半的患者已在病情缓解中活过了22.3个月。基于这款新药的潜力，美国FDA曾授予其孤儿药资格和优先审评资格。在良好临床结果下，美国FDA又决定在今日加速批准这款新药上市，让它尽快造福患者。
这是FDA批准的首款治疗MRD阳性ALL的疗法，带有MRD的患者更有可能出现复发，因此一种能消除极低量残余白血病细胞的疗法，有望能帮助延长癌症的缓解期。
依照计划，获得加速批准的Blincyto，依旧需要进行随机对照试验，验证MRD的减少能带来生存期或无进展生存期的改善。

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Blinatumomab于2014年12月3日获FDA批准上市，用于治疗 复发的费城染色体阴性的B细胞急性淋巴性白血病（ALL），2014年销售额为300万美元。
Blinatumomab是一种双特异性抗体，靶向于CD19和T细胞CD3，可以连接T细胞和癌细胞，使得T细胞接近癌细胞而达到杀伤效果。此外Blinatumomab 在与T细胞结合后还可以进一步激活T细胞信号通路，使T细胞表达CD69、CD25，上调细胞黏附分子（CD2），短暂释放炎症因子，令T细胞活化，并促使T细胞增殖。
通过双特异性结合B-ALL细胞表面的CD19和T细胞表面的CD3，激活内源性T细胞，导致CD19阳性的ALL肿瘤细胞定向裂解，从而达到治疗ALL的目的

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BiTE(bispecific T-cell engager双特异性T细胞接合器)所代表的一类具有显著抗肿瘤效应的双特异抗体，能够靶向性激活自身T 细胞杀伤肿瘤细胞。
BiTE 由两个单链可变片段( scFv) 组成，通过柔性融合接头串联连接。一个scFv 识别T 细胞表面蛋白CD3ε，而另一个scFv 识别特异性肿瘤细胞表面抗原。
BiTE 的这种结构和特异性结合蛋白能力允许它将T 细胞物理性地桥接肿瘤细胞而形成T 细胞－ BiTE － 肿瘤细胞复合物，诱导免疫突触形成，刺激T 细胞活化，产生杀伤肿瘤的细胞因子。
双特异性抗体在临床应用上展现了成本低、治疗效果好等显著优势。
与传统抗体相比在组织渗透率、杀伤肿瘤细胞效率、脱靶率和临床适应症等指标方面具有较强的竞争力，临床应用优势显著。特别在使用剂量方面，由于其治疗效果可以达到普通抗体的 100-1000 倍，使用剂量最低可降为原来的 1/2000，显著降低药物治疗成本，提高了市场空间。

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CD19分子是位于B淋巴细胞表面的抗原蛋白，化学性质为跨膜糖蛋白，别名为Leu-12。CD19在B淋巴系统恶性肿瘤如急性淋巴细胞白血病、非霍奇金淋巴瘤中广泛表达。
而在粒细胞、单核细胞、浆细胞 、T细胞及其他组织中则没有表达。
其中ALL患者中CD19表达率为80%，B细胞淋巴瘤为88%。
B-ALL中CD19表达率最高为100%。CD19已经成为B-ALL免疫治疗最重要的靶点之一。

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发表在blood杂志

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针对恶性肿瘤的双特异抗体在体内体外实验中显示有效，但是存在产量低，有副产物产生，纯化工艺繁琐等缺点。
针对这些劣势，我们研发了一个小的重组，双特异的scfv抗体。
将两个SCFV分子通过一个linker连接起来。
其中一个抗体是针对T细胞的CD3抗原，另一个抗体是针对广泛存在于B细胞上的CD19抗原。
CHO细胞表达，流式监测能和CD3/CD19特异性结合。可以引导T细胞杀伤CD19阳性淋巴细胞，10-100pg/ml的浓度，对于效应细胞：靶细胞=2：1的情况下显示有显著的细胞杀伤作用。
和其他同期的CD3×CD19双抗相比较，BiTE分子生产工艺简单，在没有T细胞预刺激的情况下，也能在低剂量情况下诱导淋巴细胞介导的细胞杀伤作用。
该种抗体分子可能会成为治疗非霍奇金淋巴瘤的治疗性药物。